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羟自由基清除能力试剂盒微板法操作原理

242 人阅读发布时间:2025-06-10 11:53

     羟自由基清除能力 试剂盒微板法是一种用于测定样品(如植物提取物、药物等)清除羟自由基能力的实验方法。羟自由基(·OH)是一种强氧化剂,对生物体内的细胞和组织具有很强的损伤作用,因此评估样品的清除能力具有重要的生物学和医学意义。

一:操作原理

1.  羟自由基的生成:
   通常在实验中,通过Fenton反应或其他化学反应生成羟自由基。Fenton反应是指通过过氧化氢(H₂O₂)与铁离子(Fe²⁺)反应生成羟自由基的过程:
   \text{Fe}^{2+} + \text{H}_2\text{O}_2 \rightarrow \text{Fe}^{3+} + \cdot OH + \text{OH}^-

2.  反应体系的建立:
   在微板中,将样品(如提取液或药物)与生成羟自由基的反应体系混合。反应体系中通常还会包含一些指示剂,这些指示剂能够与羟自由基反应并产生可测量的信号(如颜色变化)。

3. 羟自由基清除反应:
   样品中的抗氧化成分(如多酚、维生素C等)能够与羟自由基反应,清除羟自由基,从而减少指示剂的反应程度。通过比较样品存在与否时指示剂的反应强度,可以评估样品的清除能力。

4. 信号测定:
   通过微板读数仪(如酶标仪)测定反应后溶液的光吸收度或荧光强度。通常,羟自由基的清除能力越强,指示剂的反应程度越低,最终的光吸收度或荧光强度也越低。

5. 数据分析:
   根据标准曲线或对照组的结果,计算样品的羟自由基清除能力,通常以IC50(半数抑制浓度)或清除率(%)的形式表示。

羟自由基清除能力试剂盒微板法是一种灵敏、可靠的检测方法,能够定量评估样品的抗氧化能力,为研究其生物活性提供重要依据。

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