赛默飞的Lipofectamine RNAiMAX转染试剂，13778150操作步骤

Lipofectamine RNAiMAX转染试剂的操作步骤分为正向转染和反向转染，以24孔板为例，正向转染的操作步骤如下 ：
 
1. 转染前准备：转染前一天，在500µL不含抗生素的生长培养基中对细胞进行铺板，使转染时细胞汇合度为30%-50%。
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2. 制备RNAi双链体-Lipofectamine RNAiMAX复合物：用50µL不含血清的Opti-MEM I减血清培养基稀释6pmol RNAi双链体，轻轻混匀；使用前轻轻混匀Lipofectamine RNAiMAX，取1µL在50µL Opti-MEM I减血清培养基中稀释，轻轻混匀；将稀释的RNAi双链体与稀释的Lipofectamine RNAiMAX混合，轻轻混匀并在室温下孵育10-20分钟。
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3. 添加复合物到细胞中：将RNAi双链体-Lipofectamine RNAiMAX复合物添加至含有细胞的每个孔内，使最终体积为600µL，最终RNA浓度为10nM，轻轻前后晃动培养板混匀。
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4. 细胞孵育：在CO₂培养箱中于37°C下孵育细胞24-48小时，直至准备好检测基因敲低效果，培养基可在4-6小时后更换。
 
对于某些细胞系（例如MCF-7或HepG2），建议进行反向转染，反向转染要求细胞密度≥90%，具体操作可参考相关说明书或者文献